Esta es la técnica más utilizada para estudiar las pro-teínas en forma integral como una prueba de tamización, por lo tanto se requieren estudios adicionales y más específicos para el diagnóstico de las alteraciones aquí reportadas. Es el resultado de un estímulo inmunológico relacionado con procesos inmunes crónicos como las enfermedades del tejido conectivo como lupus eritematoso diseminado y artritis reumatoide, enfermedades hepáticas como cirrosis, hepatitis crónica activa, enfermedades infecciosas, especialmente las formas más crónicas como osteomielitis, leishmaniosis visceral, lepra y tuberculosis, sarcoidosis y enfermedades malignas especialmente, leucemias y linfomas. [email protected] Se compara el patrón de la electroforesis del paciente, después de ser «leído» con un densitómetro, con el esperado, de acuerdo al conocimiento previo de patrones de la «electroforesis normal» y de algunas formas o patrones anormales [138]. (A) electroforesis de proteínas en suero; (B) la misma muestra en plasma, en cierculo se muestra el fibrinógeno.. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 52 Germán Campuzano Maya de tomársele la muestra. En estos casos también se eleva el fibrinógeno, situado en las β-globulinas, pero no aparece cuando la electroforesis se hace en suero, debido a que éste se retira con el coágulo sanguíneo. Las hipogammaglobulinemias pueden presentarse como una forma primaria por síndrome de Wiskott-Aldrich, enfermedad de Bruton y ataxia telangiectásica o secundaria por gammapatías monoclonales (mieloma múltiple), terapia inmunosupresora, proteinuria de Bence-Jones y síndrome de inmunodeficiencia adquirida. La hipogammaglobulinemia es sugestiva de una variante de mieloma múltiple, conocida como de cadenas livianas, 20% de las formas de mieloma múltiple, en la cual se excreta Figura 9. 49. Utilidad clínica Las α-2-globulinas se aumentan cuando se elevan las α-2-macroglobulinas, especialmente en los pacientes con síndrome nefrótico, en el cual también hay una marcada disminución de la albúmina [33]. Las γ-globulinas se encuentran disminuidas en la hipogammaglobulinemia y en la agammaglobulinemia primaria o secundaria. Módulo 5 (Inmunología), número 6. Campuzano-Maya G. La electroforesis de proteínas y su aplicación en la clínica. Valor de referencia en la electroforesis (puede variar de acuerdo con el laboratorio): 0,72 a 1,27 g/dL; 11,1 a 18,8%. 86 Revista de Investigación en Discapacidad www.medigraphic.org.mx La electroforesis capilar (EC) es una técnica analítica que permite la separación y cuantifi cación de una amplia gama de analitos (iones, péptidos, proteínas, carbohidratos, esteroides, ácidos nucleicos, vitami-nas, fármacos, células, etcétera)1,2 provenientes de Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 48 Germán Campuzano Maya Análisis cuantitativo Se hace utilizando los valores de cada uno de los grupos de proteínas identificados como bandas en las placas de acetato de celulosa o como fracciones en los reportes leídos con la ayuda de un densitómetro. Am J Med 1997; 102: 319-320. Am Fam Physician 2002; 65: 1575-1578. La técnica permite separar moléculas cargadas y explota diferencias en movilidad cuando se les somete a la acción de un campo eléctrico. Liver 1984; 4: 255-263. En el suero humano se han identificado más de 120 proteínas con un amplio rango de heterogeneidad y han sido clasificadas en regiones tales como la albúmina, las α-globulinas, las β-globulinas y las γ-globulinas de acuerdo a su carga eléctrica y a su peso molecular. 9. 21. Kanoh T, Uchino H, Kusaka M. Massive intramedullary globules in IgA monoclonal gammopathy associated with gastric carcinoma. Stewart AK, Glynn MF. Otras proteínas que, en menor cantidad pero de mucha importancia clínica, hacen parte de esta fracción son la eritropoyetina, las glicoproteínas y algunas enzimas como la deshidrogenasa láctica, la fosfatasa alcalina y la colinesterasa. Patrón de inflamación aguda El patrón electroforético de la inflamación aguda se caracteriza por disminución de la albúmina y elevación de las α-1-globulinas y las α-2-globulinas, entre las cuales se encuentran la mayoría de los reactantes de fase aguda. Patrón de inflamación crónica Figura 6. Address: Copyright © 2023 VSIP.INFO. En algunos pacientes con deficiencia de hierro severa, se puede presentar un «pico monoclonal», muy similar al que se presenta en el mieloma múltiple [35], como se observa en la figura 4. 66. Las muestras de orina se pueden recoger como una muestra aleatoria o como muestra de orina de 24 horas. 92. Cuantificación de proteínas totales. Si la molécula tiene carga. All rights reserved. Meindok H. Diagnostic significance of hypoalbuminemia. Sullivan DH, Sun S, Walls RC. 8. Forma en que se realiza el examen Se necesita una muestra de sangre. L a electroforesis de proteínas es una prueba de laboratorio de utilidad para el estudio de las enfermedades que alteran las proporciones de las proteínas en un amplio grupo de enfermedades como se analizará en el curso de este módulo. Correr la electroforesis en tampón Tris-HCl 0,025 M, pH 8,8, glicina 0,192 M y SDS. Existen 4 niveles de complejidad creciente y cada uno se construye a partir del anterior: Estructura primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria. Las proteínas de menor tamaño se resuelven en la parte inferior del gel, y las de mayor tamaño van quedando retrasadas, observándose en la parte superior. Jpn J Med 1986; 25: 57-58. 72. N Engl J Med 2002; 346: 564-569. Bradford y Lowry, Electroforesis en gel de poliacrilamida SDS-PAGE. Widespread scleredema accompanied with a monoclonal gammopathy in a patient with advanced ankylosing spondylitis. La hipoalbuminemia en los procesos inflamatorios puede producirse como respuesta a uno o varios de los siguientes factores: (1) hemodilución, (2) pérdida de albúmina hacia el espacio extravascular en las áreas de inflamación, (3) aumento por las células locales y (4) por disminución en su síntesis como resultado directo de algunas citoquinas como el factor tumoral α, las interleuquinas 1 y 6 y por aumento de la presión osmótica de las proteínas [9-11]. También se le conoce como pico monoclonal M o paraproteína. S Afr Med J 1981; 59: 725-726. También se elevan en las mujeres que consumen anticonceptivos orales, mujeres gestantes y en pacientes con situaciones clínicas o enfermedades que elevan los niveles séricos de la α-feto-proteína como la gestación, los tumores germinales, el hepatocarcinoma y los tumores del seno endodérmico. South Med J 1998; 91: 851-854. Corti MC, Guralnik JM, Salive ME, Sorkin JD. 117. Arch Neurol 2000; 57: 740-742. Guder WG, Hofmann W. Differentiation of proteinuria and haematuria by single protein analysis in urine. Jonsson V, Svendsen B, Vorstrup S, Krarup C, Schmalbruch H, Thomsen K, et al. 88. Randi ML, Tison T, Ruzzon E, Pacquola E, Girolami A. Figura 12. Br J Haematol 2003; 121: 405-410. Tabla 3. Cuando hay alteración de las γ-globulinas, ésta puede ser generalizada o de varias de ellas, dando la forma conocida como policlonal. En niños el hallazgo de una gammapatía monoclonal es la excepción. La albúmina se encuentra disminuida en una gran variedad de situaciones clínicas como resultado de la disminución de su síntesis o aumento de su catabolismo, ya sea por utilización o por pérdida, o la combinación de ambos mecanismos [4]. Cuando se encuentra aumento de las α-2-globulinas y no hay criterios para establecer diagnóstico de síndrome nefrótico (hipoproteinemia, hipoalbuminemia, edema, hiperlipidemia y proteinuria), se debe considerar la posibilidad de que éste Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 51 La electroforesis de proteínas: más que una prueba de laboratorio se deba a un aumento de las haptoglobinas, de la ceruloplasmina u otras proteínas, como la α-1-glicoproteína ácida, el fibrinógeno y la antitripsina, la mayoría de ellas como reactantes de fase aguda que, a su vez, pueden estar asociados con colagenosis, infecciones, enfermedades malignas y necrosis tisular, entre otras circunstancias clínicas. Ward AM, Shortland JR, Darke CS. J Am Acad Dermatol 2004; 51: S94-96. Arch Intern Med 2001; 161: 864-867. Medellín, Colombia. En los pacientes con deficiencia de hierro (recuérdese que la prevalencia global de esta deficiencia puede llegar hasta el 30% [34]) se encuentra aumento de las β-globulinas debido al aumento de los niveles de transferrina, situación que es más notoria en gestantes, mujeres menstruantes y adolescentes. 79. Sus principales funciones son transportar y almacenar una gran variedad de ligandos como la cistina, el glutatión, el calcio, el hierro, el cobre y el zinc, entre otros; regular la presión oncótica del plasma y servir como fuente de aminoácidos endógenos. Aumento de gamma-globulina: El aumento de las proteínas de la fracción de gamma-globulinas ocurre frente a infecciones, inflamaciones y enfermedades autoinmunes, como artritis reumatoide. medio. Macrocytosis associated with monoclonal gammopathy. Am J Clin Pathol 1964; 42: 1-21. Arnulf B, Bengoufa D, Sarfati E, Toubert ME, Meignin V, Brouet JC, et al. Clin Biochem 1993; 26: 277-282. Biclonal gammopathy in a patient with lymphoproliferative disease and lung cancer. Cuando se requiere cuantificar, sobretodo en pacientes con enfermedades hepáticas, con quemaduras, con insuficiencia cardiaca congestiva y en la evaluación del estado nutricional, debe utilizarse un método sensible como la nefelometría o la turbidimetría. Two case reports. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 50 Germán Campuzano Maya Usualmente no se detecta en las electroforesis de proteínas en suero, a no ser que se utilice una técnica de alta resolución. Joint Bone Spine 2002; 69: 6267. Am Fam Physician 2005; 71: 105-112. Oligo-/monoclonal gammopathy and hypergammaglobulinemia in ataxia-telangiectasia. 35. Open navigation menu. 116. y Artículos Obtenidos por Biotecnología—Valoración de Proteínas Totales á1057ñ. Klein S. The myth of serum albumin as a measure of nutritional status. Isr Med Assoc J 2002; 4: 466-467. Mildred Joselyn Alvarez Silva 18310438, 18310438@itlp.edu.mx , G Fecha: 17.Octubre.2022. Forman MB, Sandler MP, Ninin DT. Patrón de hipogammaglobulinemia Desde el punto de vista de la electroforesis de proteínas, la hipogammaglobulinemia se define electroforéticamente como una disminución de las γ-globulinas, usualmente sin otros cambios importantes en las otras bandas. J Gastroenterol Hepatol 2003; 18: 459-460. Charney DA, Wasser W. A 36-year-old man with a monoclonal gammopathy and nephrotic syndrome. 22. Análisis de proteínas por electroforesis en geles de poliacrilamida en condiciones denaturantes (SDS-PAGE) y Western Blot. Por último, se establecen las bases para su adecuada interpretación. La electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE) con dodecilsulfato sódico (SDS) permite la separación de proteínas en función de su masa molecular. Download Free PDF. Estructura de las proteínas La función de las proteínas está basada en su estructura tridimensional (orientación en el espacio de las cadenas polipeptídicas). 44. Medicina & Laboratorio 1997; 7: 577-593. 12. Para que esta dependencia sea correcta, es preciso TEMA 3: Métodos para el análisis de proteínas 3.1. Rheumatol Int 2000; 19: 235-241. 97. Genetic and drug-induced variation in serum albumin. La electroforesis en gel es el método más conveniente para realizar separaciones de macromoléculas (ADN y Proteínas). Mayo Clin Proc 1987; 62: 719-731. Randi ML, Ruzzon E, Tezza F, Tezza F, Pacquola E, Fabris F. Monoclonal gammopathy in human leishmaniasis. En este método, se incorpora el detergente SDS en un tampón de migración. Br J Haematol 2002; 119: 706-708. 109. Matsubayashi S, Tamai H, Nagai K, Kuma K, Nakagawa T. Monoclonal gammopathy in Hashimoto’s thyroiditis and malignant lymphoma of the thyroid. También se encuentra disminuida en los pacientes con leucemia linfocítica crónica y algunas formas de mieloma múltiple, especialmente aquellos con grandes pérdidas de proteínas en la orina. Radiol Med (Torino) 2004; 108: 172-179. Cirrosis, hepatitis autoinmune Gammapatía policlonal Gammapatía monoclonal Cirrosis Enfermedad perdedora de proteínas Albúmina usualmente disminuida Aumento de las γ-globulinas Formación de puentes β-γ Albúmina disminuida Aumento de las α-2globulinas Disminución de las γ-globulinas Síndrome nefrótico, enfermedades exudativas de la piel, gastroenteropatías Ausencia o disminución significativa de las α-1-globulinas Deficiencia de α-1-antitripsina Hiperbetaglobulinemia Albúmina normal o disminuida Aumento de las β-globulinas Hiperlipidemia, diabetes mellitus, deficiencia severa de hierro Inmunodeficiencia Ausencia o disminución significativa de las γ-globulinas Inmunodeficiencia congénita o adquirida Deficiencia de α-1-antitripsina amiloidosis. Introducción (10 puntos) Patrón electroforético de inflamación circunstancias, el patrón electroforético aguda. Laso FJ, Martin C, Miralles JM, Paz JI, de Castro S. [Cirrhosis, hepatoma and monoclonal transformation (myeloma?) Preparación de la curva de calibración para la cuantificación de proteínas. La movilidad dependerá de la carga que presentan al pH que trabajemos. movilidad en un campo eléctrico. La separación se realiza comúnmente en un gel que funciona como filtro y está constituido habitualmente de materiales como agarosa o poliacrilamida. Otro tipo de electroforesis que modifica la posición del gel, es la electroforesis vertical, se utiliza para separar proteínas y requiere de geles de poliacrilamida. 75. Vi. Keywords: electrophoresis, human proteins, zones, screening. Dezube BJ, Aboulafia DM, Pantanowitz L. Plasma cell disorders in HIV-infected patients: from benign gammopathy to multiple myeloma. Adv Clin Chem 1980; 21: 101-146. Moreno-Ancillo A, Cosmes-Martín PM, Domínguez-Noche C, Martín-Nuñez G, Fernández-Galán MA, López-López R, et al. Von Willebrand’s syndrome presenting as an acquired bleeding disorder in association with a monoclonal gammopathy. Seven new cases with a literature review. La electroforesis de proteínas no es la panacea debido a que ninguno de sus resultados es patognomónico, debe ser solicitada e interpretada dentro del contexto clínico y la lógica médica. Allergol Immunopathol (Madr) 2004; 32: 86-88. Hepatic and metabolic effects of alcohol. Utilidad clínica El estudio de la albúmina por electroforesis tiene mayor importancia que su determinación por métodos químicos, debido a que permite identificar los casos, afortunadamente raros, de analbuminemia [6, 7] y de bisalbuminemia [8]. 47. Johnson AM, Rohlfs EM, Silverman LW. Su densidad de carga es muy elevada, por lo que su velocidad de migración también lo Antes de preparar las muestras con los diferentes componentes, realizamos una preparación de las proteí- nas consistente en hacer dos procesos de ebullición en el bloque térmico a 100 °C durante 5 min, desechando 254 De la Fuente González A et al. Principales aminoácidos responsables de la carga neta de una proteína, dependiendo del pH. JAMA 1986; 255: 39. 23. Atherosclerosis 2001; 156: 217-225. Monoclonal gammopathy in a patient with chronic active hepatitis. INTRODUCCIÓN La electroforesis capilar es un método de análisis físico basado en la migración, dentro de un capilar, de analitos cargados . Helicobacter pylori infection and monoclonal gammopathy of undetermined significance. Tsutsumi M, Hara T, Fukasawa R, Koiso K. Prostatic cancer presenting monoclonal gammopathy: report of two cases. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 54 Germán Campuzano Maya Gammapatía monoclonal de origen desconocido Ante una gammapatía monoclonal, se debe considerar en todos los casos el diagnóstico de discrasia de células plasmáticas [37], pero no debe olvidarse, como ya se ha expresado, que también se puede presentar con otras enfermedades o como un hallazgo único en algunos pacientes [38-40]. Am J Hematol 2006; 81: 115-117. 4. A case of monoclonal gammopathy associated with acute myelomonocytic leukemia with eosinophilia suggested to be the result of lineage infidelity. La dirección de la migración de las moléculas depende del pH Médico especialista en Hematología y Patología Clínica. 133. 131. Carbamazepine induced transient monoclonal gammopathy and immunodeficiency. 128. En la figura 11 se muestra un proteinograma típico de una enteropatía perdedora de proteínas. La disminución de la síntesis puede ser primaria o genética como la analbuminemia o adquirida como resultado de un proceso inflamatorio. Acquired von Willebrand disease associated with free lambda light chain monoclonal gammopathy, normal bleeding time and response to prednisone. Manschot SM, Notermans NC, van den Berg LH, Verschuuren JJ, Lokhorst HM. J Clin Gastroenterol 2002; 34: 147-149. 3 geles de poliacrilamidas-SDS 12%. Kyle RA, Therneau TM, Rajkumar SV, Offord JR, Larson DR, Plevak MF, et al. Long-term interleukin-6 administration stimulates sustained thrombopoiesis and acute-phase protein synthesis in a small primate--the marmoset. Como prueba tamiz en personas mayores de 40 a 50 años, especialmente en aquellos que presentan sintomatología inespecífica y oportunidad. Isoelectroenfoque. 119. Utilidad clínica Las β-globulinas se encuentran aumentadas en muchas circunstancias. Elementos necesarios para una electroforesis Tanto la albúmina como la globulina transportan sustancias por el torrente sanguíneo. En la figura 9 se muestra el proteinograma típico de una hipogammaglobulinemia. Se sintetiza en el hígado en forma proporcional con la ingesta de proteínas. Lipsker D, Veran Y, Grunenberger F, Cribier B, Heid E, Grosshans E. The Schnitzler syndrome. En la figura 2 se muestra el primer caso de disalbuminemia encontrado en el medio. 135. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS La electroforesis de proteínas es una metodología que permite separar las proteínas presentes en sangre (suero) o en orina. J Heart Lung Transplant 2001; 20: 237. 126. 96. Shibolet O, Schatz O, Krieger M, Maly A, Caraco Y. Schnitzler syndrome: chronic urticaria, fever and immunoglobulin M monoclonal gammopathy. 3.2. A new strategy for characterizing proteinuria and haematuria from a single pattern of defined proteins in urine. Las 6 fracciones proteicas son: albúmina, alpha-1 globulina, alpha-2 globulina, beta-1 y beta-2 globulinas y gammaglobulina. RESUMEN La electroforesis en geles de poliacrilamida es uno de los métodos más utilizados para la purificación, análisis y caracterización de proteínas. The depletion of fibrinogen and plasminogen. Close suggestions Search Search. Sailler L, Ecoiffier M, Cadroy Y, Couret B, Sie P, Mazurier C, et al. Determinación cuantitativa de proteínas mediante el método de Biuret: Se basa en la formación de un complejo coloreado entre el Cu2+ y los grupos NH de los enlaces peptídicos en medio básico. Screening of concentrations of C-reactive protein and various plasma protease inhibitors preoperatively for the prediction of postoperative complications. Arch Intern Med 2002; 162: 464-467. Editora Médica Colombiana S.A., 2006©. Low molecular weight proteinuria. las proteínas plasmáticas por: - Fenómenos de hemoconcentración. En estos casos se encuentra que la albúmina puede estar normal o muy disminuida de acuerdo con la cronicidad y el daño hepático y que las α-2-globulinas usualmente están disminuidas. Larocca LM, Zollino M, Carbone A, Eboli ML, Mango G, Leone G. Chronic myeloid leukemia with monoclonal gammopathy terminating in myeloid crisis and immunoblastic lymphoma. 61. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 60 Germán Campuzano Maya Patrón de gammapatía monoclonal Esta forma es la expresión de la hiperproducción de una inmunoglobulina en forma monoclonal. 85. - Las moléculas cargadas se mueven a través de un gel . Clin Chem 1994; 40: 2154-2161. Admission serum albumin level as a predictor of outcome among geriatric patients. Mayo Clin Proc 2004; 79: 687-689. Puede ser benigna o maligna. Suarez-Vilela D, Izquierdo-Garcia FM. La hipogammaglobulinemia secundaria está asociada con el síndrome nefrótico, algunas enfermedades avanzadas, el síndrome de inmunodeficiencia humana (sida) y en pacientes que reciben esteroides por períodos prolongados. In: Tietz textbook of clinical chemistry, C. A. Burtis and E. R. Ashwood.3th ed, 1999; Saunders, Philadelphia. Ryffel B, Car BD, Woerly G, Weber M, DiPadova F, Kammuller M, et al. Con la técnica de electroforesis más utilizada en la clínica, el acetato de celulosa, es posible identificar cinco grupos a saber: albúmina, α-1-globulinas, α-2-globulinas, β-1-globulinas, β-2-globulinas y γ-globulinas, como se muestra en la figura 1. Proteínas de reserva más abundantes en el grano. Electroforesis en geles de gradientes. Ann Hematol 2003; 82: 214-217. Nephrotic syndrome, renal insufficiency, and a monoclonal gammopathy. Sadighi Akha AA, Humphrey RL, Winkelstein JA, Loeb DM, Lederman HM. El - Acentuación del metabolismo. Patrón de enfermedad hepática crónica Figura 7. Aparato de electroforesis vertical para proteínas. 2. la electroforesis en gel de poliacrilamida con SDS De este modo se es capaz de separar: • proteínas de masa molecular idéntica que difieren en su pI ó • proteínas con valores de pI similares pero con diferentes masas moleculares. Porcel JM, Ordi J, Tolosa C, Selva A, Castro-Salomo A, Vilardell M. Monoclonal gammopathy in systemic lupus erythematosus. 83. La electroforesis de las proteínas del suero o proteinograma es un método semicuantitativo de análisis de las proteínas, frecuentemente solicitado a muchos laboratorios clínicos. La proteína que con mayor frecuencia modifica negativamente esta fracción es la haptoglobina. Ueki H. Generalized discoid lupus erythematosus with benign monoclonal gammopathy. 59. La electroforesis de proteínas permite identificar y separar las proteínas por la sumisión a la acción de un campo eléctrico. Case report and literature review. Inmunología 58. Un aparato de electroforesis capilar se compone de una fuente de alimentación de corriente continua (directa . Las gammapatías policlonales que se encuentran asociadas con lupus eritematoso diseminado y artritis reumatoide se hacen especialmente a expensas de las IgA. En la figura 5 se esquematiza el proteinograma típico de la inflamación aguda. 53. N Engl J Med 2006; 354: 1362-1369. Electroprotidograma en la distrofia con edemas: (Estudio de 43 casos) . Lu CI, Yang CH, Hong HS. En este caso se observa una banda ancha y difusa que compromete toda la región. 43. Electroforesis de Proteínas Las proteínas son moléculas cuya carga neta depende del contenido de una serie de aminoácidos (fundamentalmente ácido glutámico, ácido aspártico, lisina, arginina e histidina) y del grado de ionización de éstos al pH considerado (figura 7). 111. Cargar en pocillos 10 μl de F 3 y 5 μl del estándar de proteínas. Monoclonal gammopathy of undetermined significance and exposure to breast implants. 112. 20. Paueksakon P, Revelo MP, Horn RG, Shappell S, Fogo AB. Markowitz GS, Zdunek MP, D’Agati VD. Patrón electroforético de una enteropatía produce una mayor pérdida de proteínas perdedora de proteínas. En el primer caso, usualmente el incremento cuantitativo no es muy importante, permanece constante y no hay disminución de las otras inmunoglobulinas; en el segundo caso, su causa es maligna, usualmente asociada con discrasias de células plasmáticas que incluye el mieloma múltiple, la macroglobulinemia de Waldeström y la amiloidosis primaria y ocasionalmente con enfermedades malignas linforreticulares como la leucemia linfocítica crónica y los linfomas no Hodgkin. Tabla 3. En la figura 7 se muestra el proteinograma típico de una hepatopatía crónica severa. Patrón electroforético de una hipogamproteína de Bence-Jones por la orina sin maglobulinemia. JAMA 1994; 272: 1036-1042. Técnicas de separación de proteínas. Powell FC, Greipp PR, Su WP. Hay disminución de la albúmina, de las α-1globulinas, β-globulinas y γ-globulinas, con aumento síndrome nefrótico. Cuando se pasa una corriente eléctrica a través . Eur J Haematol 1998; 61: 140-144. Jpn J Clin Oncol 1984; 14: 699-704. Sus propiedades biológicas, así como muchas de sus propiedades físicas y químicas dependen de la integridad de sus estructuras, lo que influye directamente en su funcionalidad, en base a la . Figura 1. Kamihira S, Taguchi H, Kinoshita K, Ichimaru M. Monoclonal gammopathy in adult T-cell leukemia/lymphoma: a report of three cases. Taher A, Abiad R, Uthman I. Coexistence of lupus anticoagulant and acquired haemophilia in a patient with monoclonal gammopathy of unknown significance. Cadnapaphornchai P, Sillix D. Recurrence of monoclonal gammopathy-related glomerulonephritis in renal allograft. 67. J Rheumatol 1983; 10: 210-215. 90. J Korean Med Sci 2004; 19: 481-483. Am J Kidney Dis 2003; 42: 1097-1101. 69. Finazzi G, Cortelazzo S, Viero P, Barbui T. IgM gammopathy and the lupus anticoagulant syndrome in habitual aborters. 2006; 6. Gammapatía monoclonal La gammapatía monoclonal, contrario a lo que sucede en la gammapatía policlonal, es el resultado de la hiperproducción de una inmunoglobulina única, dependiente de una sola clona de células productora, que con el tiempo da como resultado da como resultado el aumento desproporcionado de una determinada inmunoglobulina, o fracción de ésta, que a la electroforesis de proteínas da una banda estrecha o un pico alto con base estrecha, ubicado en la región correspondiente eletroforeticamente a la sustancia producida por las células productoras de las mismas, banda o pico denominado gammapatía monoclonal [4]. Tiselius . Immunodeficiency 1993; 4: 67-69. Sistema de Integrado de Gestión. 74. 2. 102. 25. Association of monoclonal gammopathy and polycythemia vera or essential thrombocythemia: study of a large cohort of patients. algunos casos de diabetes mellitus, como resultado del aumento del colesterol y sus fracciones lipoproteícas. Eur J Gastroenterol Hepatol 1999; 11: 205-207. 81. The current article is a comprehensive review on the most important characteristics of protein electrophoresis, its reference values and the most interesting clinical alterations with the corresponding figures. Kyle RA. monoclonal. Los geles se comportan como un tamiz molecular y permiten separación molecular. Medicina & Laboratorio 2006; 12: 47-70. Debido a que las variaciones de las haptoglobinas y de la ceruloplasmina pueden no ser significativas, cuando hay sospecha clínica de que ésto está sucediendo se deben medir por un método más sensible, como la nefelometría y la turbidimetría β-globulinas Esta banda está compuesta por dos subgrupos, las β-1-globulinas y las β-2-globulinas, que para efecto del análisis se trataran bajo un solo grupo: las β-globulinas. leishmaniasis [63] Enfermedades del tejido conectivo Arteritis temporal [64] Artritis reumatoide [65-67] Escleroderma [68] Lupus eritematoso discoide [69, 70] Lupus eritematoso sistémico [71-75] Sarcoidosis [76] Enfermedades hepáticas Cirrosis [77, 78] Alcoholismo Hepatitis autoinmune Cirrosis biliar primaria [78] Hepatitis inducida por virus [44-49] Esclerosis múltiple [79, 80] Colangitis esclerosante primaria Enfermedades malignas Tumores solidos [81] Tumores de ovario [82] Cáncer de pulmón [83, 84] Tumores renales Cáncer de hígado [85] Tumores gástricos [86] Cáncer de próstata [87] Enfermedad renal [88] Enfermedades hematológicas y linfoproliferativas Anemia perniciosa [89, 90] e infección por Helicobacter pylori [91] Ataxia telangiectásica [92] Enfermedad de von Willebrand adquirida [93-98] Enfermedad de Hodgkin [99] Leucemia linfocítica crónica [100, 101] Leucemia mieloide crónica [102] Leucemia mielomonocítica [103] Linfoma de Burkitt [104, 105] Linfomas no Hodgkin [106-108] Macrocitosis (sin etiología asociada) [109] Policitemia rubra vera [110] Síndrome de anticoagulante lúpico [111-115] Talasemia [116] Trombocitosis esencial [110] Enfermedades renales Glomerulonefritis proliferativa [117] Insuficiencia renal [118] Síndrome nefrótico [118, 119] Medicamentos Carbamazepia [120] Varias no clasificadas en los grupos anteriores Angioedema adquirido tipo 2 [121] Hiperostosis esquelética idiopática [122] Hiperparatiroidismo primario [123] Implantes de mama [124] Meningiona coroideo [125] Polineuropaía [126] Síndrome de Schnitzler (urticaria crónica, fiebre y gammapatía monoclonal) [127-129] Sobrevivientes de bomba atómica [130, 131] Tiroiditis de Hashimoto [132] Trasplantes (por el tratamiento inmunosupresor), cardiaco [133], renal [134, 135] Xantomatosis normolipémica [136]Hipertensión pulmonar [137] Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 56 Germán Campuzano Maya Una variante de este patrón es el que se presenta en los casos de inflamación subaguda, en los cuales los reactantes de fase aguda, especialmente la proteína C reactiva, la α-1-antitripsina, la α-1glicoproteína ácida (orosomucoide) y el complemento, se «normalizan» o tienden a «normalizarse», en tanto que la reacción inmunológica es mayor, con aumento de las inmunoglobulinas, característicamente de tipo policlonal. compromete todas las fracciones electroforéticas. Presse Med 1985; 14: 487. Font J, Cervera R, Pallares L, Lopez-Soto A, Ingelmo M. Systemic lupus erythematosus and monoclonal gammopathy. World Health Stat Q 1985; 38: 302-316. Se trata de una técnica fundamentalmente analítica, aunque también se puede realizar con fines preparativos. Clin Biochem 2005; 38: 654-658. El tiempo que hemos empleado en la electroforesis fue de 14 horas en un am­ biente fresco (de 18 a 20° c.). sencia de proteínas «M» utilizando una combinación de pruebas que debe incluir una electroforesis de proteínas séricas, inmunofijación sérica y la cadena ligera libre de suero. En la siguiente En estas Figura 5. En este proteinograma hay disminución variable de la albúmina con aumento moderado en las α-1-globulinas, las α2-globulinas, las β-globulinas, especialmente el complemento, y las γ-globulinas, por aumento policlonal de las IgG e IgM. ca 1948. aisló e identificó por electroforesis proteínas de la sangre y de la leche, además obtuvo por absorción la sepa-ración de diversos aminoácidos. A case report. Hamazaki K, Baba M, Hasegawa H, Kai M, Araki M, Watanabe N, et al. Mant MJ, Hirsh J, Gauldie J, Bienenstock J, Pineo GF, Luke KH. Aparte de las enfermedades relacionadas con las discrasias de células plasmáticas, son muchas las enfermedades informadas en la literatura médica mundial relacionadas con la presencia de gammapatía monoclonal, entre ellas infecciones [42-63], enfermedades del tejido conectivo [64-76], enfermedades hepáticas [44-49, 77-80], enfermedades malignas [81-88], enfermedades hematopoyéticas y linfoproliferativas [89-116], enfermedades renales [117-119], medicamentos [120] y un amplio grupo de enfermedades no agrupables [121-137], como se relacionan en la tabla 2. Laboratorio al Día 1990; 2: 5. Koerper MA, Dallman PR. Existen diferentes métodos de electroforesis que difieren esencialmente en el tipo de moléculas objeto de estudio y en los soportes físicos. Cuando está bien indicada y es interpretada correctamente, tiene una buena relación costo-beneficio y es de gran ayuda para el médico. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 64 Germán Campuzano Maya 38. El nombre de la técnica, 2D (IEF+SDS-PAGE), sugiere que separa las proteínas: La inmunoglobulina que más se eleva es la IgM. Las proteínas eluidas de la cromatografía de afinidad de RNA se separaron mediante electroforesis desnaturalizante en geles formados por un gradiente de poliacrilamida del 4-12% (Invitrogen) utilizando el tampón 1X NuPAGE MOPS SDS Running Buffer (Invitrogen) como solución de electrolito (2,5 mM MOPS; 2,5 mM Tris base; 0,005% En los casos en que ésta es muy importante puede llegar a la unión de las γ-globulinas y de las β-globulinas y en los casos más intensos puede dar el clásico cuadro de unir dos fracciones: puente β-γ (beta-gamma). Cuantificar las proteínas resultantes de cada extracto. SECCIÓN 6:VARIANTES DE ELECTROFORESIS 35 6.1 Electroforesis bidimensional 35 6.2 Electroforesis de capilaridad 35 6.3 Electroforesis en campo pulsado (PFEG) 36 SECCIÓN 7:VERIFICACIÓN DE LA CALIDAD ÓPTIMA DE LOS EQUIPOS Y REACTIVOS EMPLEADOS 37 7.1 Generalidades 37 7.2 Buffer para electroforesis de proteínas y ADN 37 7.3 Persulfato de amonio 37 Tohoku J Exp Med 1977; 123: 343-349. 78. la información que aporta el proteinograma y su asociación con diferentes enfermedades. En la electroforesis en gel de poliacrilamida con SDS, la separación de proteínas se hace en función de la masa molecular. Distribución y actividad de las proteínas de las semillas de plantas monocotiledoneas y dicotiledóneas. otros componentes electroforéticos. 73. Asztalos BF, Brousseau ME, McNamara JR, Horvath KV, Roheim PS, Schaefer EJ. En los pacientes con formas heterocigotes de deficiencia de la α-1-antitripsina, la disminución puede no ser tan significativa y, por lo tanto, en todos los casos en los cuales se sospecha, se debe medir por métodos más sensibles como la nefelometría y la turbidimetría. Las α-1-globulinas se encuentran disminuidas clásicamente en la deficiencia de la α-1-antitripsina, especialmente en los casos homocigóticos en donde puede haber ausencia de la fracción, dando un patrón electroforético característico, como se analizará más adelante. 2006. Multiple autoimmune manifestations in monoclonal gammopathy of undetermined significance and chronic lymphocytic leukemia. 46. Permite identificar aquellos pacientes que requieren una cuantificación específica mediante tecnología más sensible, como la nefelometría y la turbidimetría, de acuerdo con la alteración o las alteraciones que serán analizadas más adelante. Clin Exp Rheumatol 1987; 5: 259-261. de electroforesis en los terminales de los electrodos. compuestos que poseen grupos ionizables ( aminoácidos, péptidos, prote ínas, ácidos n ucleicos) teniendo en cuenta que la carga neta de estas s ustancias. 130. Vargas V, Pedreira JD, Vilaseca J, Ramos F, Rodrigo MJ, Guardia J. 94. Incluir la primera micción de la mañana del dia siguiente_ Esta última debe ser emitida a la misma hora de la primera orina que se eliminó el dia anterior Plazo de entrega de resultado: 1 día hábil. Patrón electroforético de enfermedad hepática crónica (cirrosis). Fig. Sarcoidosis 1992; 9: 70-72. Annu Rev Med 1979; 30: 199-211. A pesar de que ninguna de estas alteraciones es patognomónica, la normalidad de la electroforesis excluye, al menos en la mayoría de los casos, enfermedad hepática grave. Heer M, Joller-Jemelka H, Fontana A, Seefeld U, Schmid M, Ammann R. Monoclonal gammopathy in chronic active hepatitis. Biclonal IgM gammopathy in chronic lymphocytic leukemia. En la tabla 1 se relacionan los valores de referencia esperados para cada una de las fracciones electroforéticas de una electroforesis de proteínas de suero en acetato de celulosa [5]. El mieloma afecta un tipo de glóbulos blancos denominados células plasmáticas, que se encuentran en la médula ósea. Heys SD, Walker LG, Deehan DJ, Eremin OE. Three families with polyneuropathy associated with monoclonal gammopathy. López-Fernández MF, López-Berges C, Martín R, Nieto J, Del Río F, López-Borrasca A, et al. Muy similar al patrón de la inflamación aguda, hay un aumento más discreto de las α-2-globulinas que pueden ser normales y predomina la gammapatía policlonal. Biochem Med 1971; 5: 181-187. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 67 La electroforesis de proteínas: más que una prueba de laboratorio 118. Al-Shemmari SH, Siddique I, Hassan F, Nkansa-Dwamena D, El-Naga HA, Ameen R. Monoclonal gammopathy among patients with chronic hepatitis C infection. 110. Studies on a fast-migrating bisalbumin. Patrón electroforético de bisalbuminemia. La electroforesis de proteínas: más que una prueba de laboratorio Germán Campuzano Maya1 Resumen: la electr, SANCHEZ GOMEZ DN; VILLAMIZAR MOGOLLON YT; CASTRO LEON DH; MORA PINILLA KE ELECTROFORESIS DE PROTEINAS 10. Open navigation menu. South Med J 1993; 86: 1360-1361. Los niveles de albúmina no se correlacionan con la severidad, el pronóstico ni con la alteración de la función hepática [13, 14], la cual deberá ser evaluada por métodos complementarios convencionales. Fongi EG, Rascovsky S, Lagioia R, De Huberman AS, Toccalino H. [Monoclonal gammopathy associated with pernicious anemia]. 40. La electroforesis es la técnica más utilizada para estudiar las proteínas en forma integral como una prueba de tamización. Eliakim M, Zlotnick A, Slavin S. Gammopathy in liver disease. Presse Med 1984; 13: 2209-2210. Influence of methodology on the detection and diagnosis of congenital analbuminemia. Medicina & Laboratorio 2006; 12: 47-70. Electroforesis de proteínas en suero: Este examen se realiza para examinar las proteínas globulínicas en la sangre. El uso de geles de poliacrilamida que tienen un gradiente creciente de concentración de archilamida + bisacrilamida, y en consecuencia un . Monoclonal gammopathy in heart transplantation: clinical significance and risk factors. Nephron 1977; 19: 288-294. J R Coll Surg Edinb 1998; 43: 163-168. Chang HK, Kim YC, Kwon BS. 99. IgM monoclonal gammopathy, lymphoid proliferations and lupus anticoagulant. Understanding and interpreting serum protein electrophoresis. Wolf PL. 114. Leucocytoclastic vasculitis, hepatitis C virus-associated mixed cryoglobulinaemia with biclonal gammopathy and Waldenstrom macroglobulinaemia. El soporte de la electroforesis (el gel) es un entramado tridimensional que impide o reduce la difusión. En estos casos, las α-2-globulinas, particularmente las haptoglobinas, pueden permanecer elevadas o con tendencia al aumento. El patrón de la zona de las γ-globulinas puede dar una idea en relación a la(s) inmunoglobulina elavada(s): las enfermedades bacterianas crónicas, como la tuberculosis, usualmente presentan un aumento de todas las inmunoglobulinas séricas; en la cirrosis biliar primaria es característico el aumento marcado de las IgM, así como lo es las IGg en la hepatitis crónica activa y las IgA en la cirrosis portal; y, finalmente, las IgE se encuentran elevadas en pacientes con asma u otras enfermedades alérgicas especialmente en niños [4]. En cambio, la electroforesis en acetato de celulosa, o cellogel, tiene una serie de ventajas respecto al papel de filtro. 82. La intensidad de coloración es directamente proporcional a la cantidad de proteínas (enlaces peptídicos) y la . La electroforesis de proteínas es un análisis que suele usarse para encontrar sustancias anormales denominadas proteínas M. La presencia de las proteínas M puede ser un signo de un tipo de cáncer denominado mieloma o mieloma múltiple. El principio de la electroforesis consiste en la migración proporcional de las moléculas a través de un gel u otro tipo de matriz porosa, según su peso molecular o tamaño; movimiento generado por el campo eléctrico. 71. Las variaciones que se encuentren en ella pueden y deben ser confirmadas por métodos que como el radioinmunoanálisis (RIA), el inmunoanálisis enzimático (Elisa), la nefelometría y la turbidimetría que tienen mayor sensibilidad y especificidad. Karlson EW, Tanasijevic M, Hankinson SE, Liang MH, Colditz GA, Speizer FE, et al. 26. 31. J Pediatr 1977; 91: 870-874. Lamboley V, Zabraniecki L, Sie P, Pourrat J, Fournie B. Myeloma and monoclonal gammopathy of uncertain significance associated with acquired von Willebrand’s syndrome. Patrones electroforéticos típicos Patrón Inflamación aguda Variaciones de las bandas Albúmina normal o disminuida Aumento de las α-1-globulinas y/o las α-2-globulinas Enfermedades relacionadas y observaciones Enfermedades inflamatorias o infecciosas de tipo agudo (actúa como reactantes de fase aguda) Inflamación crónica Albúmina normal o disminuida Aumento de las α-1-globulina y/o las α-2-globulinas Aumento de las γ-globulinas Hipoalbuminemia Albúmina disminuida Resto de fracciones, usualmente normales Enfermedades autoinmunes, hepatopatías crónicas (incluidas la hepatitis autoinmune crónica y la cirrosis biliar primaria), infecciones crónicas y cáncer Desnutrición, enfermedad perdedora de proteínas en etapas iniciales, cáncer metastático Hipogammaglobulinemia Albúmina normal o disminuida Disminución de las γ-globulinas Enfermedades linfoproliferativas, enfermedad intestinal inflamatoria, inmunodefiencias congénitas Aumento de las γ-globulinas (base ancha) Enfermedades autoinmunes, enfermedades crónicas, hepatopatías crónicas (incluidas la hepatitis autoinmune crónica y la cirrosis), enfremdades parasitarias como leishmaniasis Albúmina normal o disminuida Aumento de las γ-globulinas (base estrecha) Mieloma, macroglobulinemia de Waldeström, gammapatía monoclonal de origen indeterminado, leucemia linfocítica crónica, linfomas no Hodgkin, amiloidosis, enfermedad de Gaucher (25% de los pacientes), SIDA (15% de los pacientes) y las incluidas en la tabla 2. Admission serum albumin level and length of hospitalization in elderly patients. Scand J Haematol 1986; 36: 302-308. Nephrol Dial Transplant 1996; 11: 2461-2465. Abreviaturas empleadas. Protein (total protein) in serum, urine, and cerebrospinal fluid: albumin in serum. Schaffner KF, Krause JR, Kelly RH. [Transitory IgM monoclonal gammopathy associated with brucellosis and tuberculosis (author’s transl)]. Hinyokika Kiyo 1993; 39: 569-571. (6) La separación por CE es muy rápida, se realiza en menos de 5 minutos, con una reproducibilidad que muestran un coefi-ciente de variación (CVs) < 2%, muchos investigadores con- É importante que o veterinário esteja apto a . 134. 86. DeMaeyer E, Adiels-Tegman M. The prevalence of anaemia in the world. Obsérvese la marcada disminución de la albúmina y de las α-2-globulinas, con el característico «puente β-γ» por aumento de las IgG, IgM e IgA. Indicaciones para ordenar una electroforesis de proteínas en suero Sospecha de enfermedades relacionadas con el mieloma múltiple, la macroglobulinemia de Waldeström y la amiloidosis primaria Neuropatía periférica inexplicable (no atribuible a diabetes mellitus, exposición a tóxicos y quimioterapia) Anemia o dolor óseo asociado con insuficiencia renal Dolor de espalda, cuando no se tiene una explicación confirmada Hipercalcemia sospechosa de malignidad (por ejemplo asociada con pérdida de peso, fatiga, dolor óseo y sangrado anormal) Presencia de fenómeno de «rouleux» o pilas de mondas en extendidos de sangre periférica Insuficiencia renal con aumento de proteínas totales Fracturas patológicas o lesiones líticas observadas en estudios radiológicos Pacientes con proteinuria Proteinuria de Bence-Jones Como parte de los estudios de pacientes con neoplasias hematológicas (leucemias, linfomas, enfermedad de Hodgkin), con enfermedades renales, con enfermedades inmunológicas (artritis reumatoide, lupus eritematoso diseminado, síndrome de Sjögren) Pacientes con enfermedades o sospecha de enfermedades relacionadas con la gammapatía monoclonal como las que se relacionan en la tabla 2. 55. 52. Lupus 1992; 1: 263-264. La SDS-PAGE se usa frecuentemente, como es el caso de la presente práctica . De otro lado, la disminución de las β-globulinas no es frecuente en la clínica y cuando ésto se presenta, usualmente se asocia con un problema de nutrición. Donnelly JL, Higgins TN. Monoclonal gammopathy after intense induction immunosuppression in renal transplant patients. Como se ha expresado, en el suero humano se han identificado más de 120 proteínas, pero hasta el momento, sólo se conoce la función del 50% de ellas. Virchows Arch 2005; 446: 85-87. Summary: protein electrophoresis is a laboratory test that allows the separation of the proteins according to its physical characteristics and the used method. Patrón electroforético de una forma homocigótica de dificiencia de α-1 antitripsina. Fremeaux-Bacchi V, Guinnepain MT, Cacoub P, Dragon-Durey MA, Mouthon L, Blouin J, et al.